RTqPCR的常规实验流程是什么？

实时荧光定量PCR（RT-qPCR）的常规实验流程主要包括以下几个步骤：

1. RNA的提取：首先需要从不同的组织样本中提取RNA。在总RNA的提取过程中，需要注意避免RNA的降解和污染5。

2. RNA浓度测定：提取后的RNA需要进行浓度测定，以确保后续实验中RNA的准确用量7。

3. 反转录合成cDNA模板：将提取的RNA通过反转录过程合成cDNA，作为PCR扩增的模板7。

4. PCR扩增：在PCR反应体系中加入荧光物质，通过荧光信号的实时接收监测PCR反应进程。PCR扩增循环数是实验中的一个重要参数211。

5. Ct值的确定：Ct值，即阈值循环数（Cycle threshold），是PCR扩增过程中荧光信号达到阈值时的循环次数。Ct值与模板的起始拷贝数存在线性关系，是定量分析的关键11。

6. 数据分析：实验结束后，将得到的原始数据进行处理和分析。这包括对Ct值的归一化处理，以及通过标准曲线进行定量分析16。

7. 结果判定：根据实验目的和数据分析结果，对实验结果进行判定。例如，在非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测中，会根据Ct值和标准曲线来判定样本是否含有病毒核酸10。

以上步骤构成了RT-qPCR的常规实验流程，每一步都是确保实验结果准确性和可靠性的关键环节。