293T细胞真菌污染处理方法

维氏气单胞菌是一种常见的人鱼共患致病菌，为研究维氏气单胞菌中的flrB基因的功能，笔者通过扩增flrB基因上下游同源臂连接至pRE112质粒中，电击转化重组质粒至大肠杆菌WM3064，接合转入野生型维氏气单胞菌，在蔗糖压力下筛选、PCR和测序验证敲除菌株。结果表明，敲除flrB基因后降低生物膜的形成，但不影响维氏气单胞菌的生长。flrB基因能促进其生物膜的形成，这为进一步揭示该基因的功能和作用机制奠定了基础。

目的从医院污水中分离鲍曼不动杆菌裂解性噬菌体，探讨其生物学特性及基因组基本信息。 方法以临床分离的鲍曼不动杆菌为指示菌，采用双层琼脂平板法分离、纯化噬菌体，观察噬菌斑特征；利用透射电子显微镜观察噬菌体的形态特征；采用点板试验测定噬菌体的裂菌谱，并观察其最佳感染复数(MOI)、一步生长曲线以及对热、酸碱等理化因素的耐受性。提取噬菌体全基因组DNA，采用Illumina Hiseq2000高通量测序，并对其基因组序列进行注释、比对分析。 结果从污水中成功分离出1株鲍曼不动杆菌的裂解性噬菌体，命名为SWH-Ab-3；噬菌体头部直径约为70 nm，尾长约80 nm，初步判断其属肌尾噬菌体科；该噬菌体裂菌谱较窄(6株/42株)，最佳感染复数为0.1，潜伏期为40 min，爆发期为50 min，裂解量为31.4 PFU/cell，对热和酸碱环境的耐受性较高。SWH-Ab-3基因组长度为41 730 bp，G+C%含量为39.38%，共编码53个ORF(33个已知功能基因，20个假想蛋白)，其序列与Abp1和vB_AbaP_B3的同源性最高(≥94.0%)，但基因组长度、G+C%含量和形态特征差异显著。 结论SWH-Ab-3为1株新分离的鲍曼不动杆菌裂解性噬菌体，属肌尾噬菌体科，对热、酸碱等理化因素较耐受，可能通过穿孔素和裂解酶组成的“二元裂解系统”发挥裂菌作用，裂解能力较强，但裂菌谱较窄。

目的评价VITEK-2Compact细菌自动化鉴定与药敏仪器对碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌（CRE）的鉴定能力。方法同时采用PCR法和VITEK-2Compact系统检测本实验室保存的93株CRE。以PCR结果为标准,评价VITEK-2Compact仪器对CRE菌株的鉴定能力。结果 VITEK-2Compact细菌自动化仪器检测CRE的灵敏度为76.4%、特异性为34.2%、阳性预测值为62.7%、阴性预测值为50.0%。结论VITEK-2Compact细菌自动化仪器检测CRE的灵敏度有待提高,需结合其他方法给予补充,以提高该仪器的鉴定率与准确率。