胰岛纯化后的纯度计算方法 请给我最详细的计算和说明

胰岛纯化后的纯度计算方法涉及多个步骤和参数，主要包括胰岛当量(IEQ)的计算、胰岛混悬液浓度的确定以及纯度的评估。以下是详细的计算和说明：

1. 胰岛当量(IEQ)的计算：首先，需要根据胰岛的大小和数量计算胰岛当量。每个胰岛的体积可以通过测量其直径并使用公式计算得出，然后将体积转换为IEQ。14

2. 胰岛混悬液浓度的确定：将纯化后的胰岛用培养液混悬，根据胰岛的IEQ总量和混悬液的体积，计算出混悬液的浓度，单位为IEQ/ml。1

3. 培养瓶数量的计算：根据所需的胰岛浓度（通常为10,000至30,000 IEQ/T-175培养瓶），计算所需的T-175培养瓶数量。每个培养瓶加入的培养液量通常在30至50 ml之间。1

4. 纯度的评估：使用DTZ染色检测胰岛的纯度，DTZ与锌螯合后，胰岛B细胞因含锌而呈猩红色，其他细胞不着色，从而实现对胰岛的特异性染色。2

5. 胰岛功能测试：通过不同浓度的葡萄糖刺激胰岛，检测胰岛素分泌反应，以评估胰岛的功能。36

6. 纯化后胰岛数量的计算：根据胰岛纯度的不同，按照配比10,000至30,000 IEQ/T175培养瓶为计算依据，除以胰岛的纯度，得出每瓶可以培养的胰岛数量。4

7. 改进方法：在某些情况下，为了提高胰岛的获取数量和质量，可以在胶原酶V分离液及Fio11-40 0纯化液中加入STI与BSA-FractionV，以改进胰岛的分离与纯化过程。10

通过上述步骤，可以对胰岛纯化后的纯度进行准确计算和评估。