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酵母双杂交3at作用
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深入研究一些
3-AT在酵母双杂交系统中具有重要作用。
3-AT的作用
抑制组氨酸表达
:3-AT作为组氨酸的竞争性抑制剂,可以抑制His3报告基因的泄露表达和轻微自激活现象
1
4
。
减少假阳性
:在Y2H双杂体系中,由于不存在泄露表达,3-AT使用较少。但在单杂Y187体系中,由于存在泄露表达和自激活,通常需要0~100mM的3-AT梯度检测来减少假阳性
1
4
。
自激活检测
:常规自激活检测不会进行3-AT浓度抑制检测,仅在存在自激活情况时才会使用3-AT进行抑制检测
1
。
单杂Y1H体系
:由于报告基因不是组氨酸营养缺陷型,无需进行3-AT自激活检测。但需对AbA报告基因设置梯度浓度自激活检测
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