HEK 293瞬转表达蛋白

• HEK 293细胞瞬时转染表达蛋白是一种高效方法。

HEK 293细胞瞬时转染

• 高密度悬浮培养：使用如Expi293表达系统，结合高密度293F细胞、优化培养基和专用转染试剂，实现快速、高产量的蛋白生产49。
• 操作简便：瞬时转染法操作简易、周期短，适合快速表达高活性蛋白，无需筛选基因，适用于结构生物学研究56。
• 表达载体选择：使用如pcDNA3.1等改造的表达载体，便于添加和去除标签，适配大规模表达需求13。

293F细胞的应用

• 悬浮细胞培养：293F细胞适应悬浮培养，通过瞬时转染技术，如使用分支型PEI配制的试剂，实现高产量蛋白表达2。
• 大规模转染：适用于从小规模30ml到大规模300ml的细胞转染，获得高产量的纯化蛋白，特别适用于需要复杂折叠机制和翻译后修饰的蛋白研究2。
• 培养基选择：使用如MetaCell® HEK293-100等化学成分确定培养基，支持293F细胞的高密度生长、瞬时转染和维持8。

转染效率和表达量

• 优化转染条件：通过摸索无血清瞬时转染条件和转染方法，以及补料维持细胞良好状态，提高瞬转产量10。
• 细胞活率和蛋白表达量：在特定培养基中，如LeTrans Medium，细胞活率高于其他培养基，瞬转蛋白表达量也高于其他培养基20%以上13。
• 瞬时转染动力学：研究转染动力学有助于理解导致病毒样颗粒（VLP）等复杂产品产生的完整过程15。