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变性PAGE 核酸
2周前
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深入研究一些
变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(变性PAGE)是核酸分离的重要技术。
变性PAGE的应用
单链核酸分离
:变性凝胶适用于线性单链核酸的分离,以碱基为单位进行尺寸区分。
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双链核酸分析
:非变性凝胶主要用于双链核酸,以碱基对为单位进行分析。
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操作步骤
凝胶选择
:根据实验需求选择琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶,后者交联度推荐为29:1。
2
样品准备
:确保样品和标准品的适当准备,包括核酸梯度选择和加载染料。
1
电泳条件
:选择合适的电泳缓冲液、电压和时间,以优化分离效果。
1
结果可视化
:使用荧光染色或紫外阴影等方法在凝胶中可视化样品。
1
常见问题
无条带或条带模糊
:可能是由于凝胶制备不当或样品上样不足。
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条带分离不佳
:可能是因为凝胶百分比不适合解析所需核酸。
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定量数据错误
:确保使用准确的分子量标准品进行样品比较。
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