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水中细菌菌落总数测定实验的实验原理
4月前
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水中细菌菌落总数测定实验的实验原理主要基于平板计数技术,这是一种通过在特定的培养基上培养细菌,然后计数生长的菌落来测定水中细菌总数的方法。以下是详细的实验原理:
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培养基的选择:由于水中细菌种类繁多,它们对营养和其他生长条件的要求差别很大,因此需要选择一种适合多种细菌生长的营养琼脂培养基。例如,牛肉膏蛋白胨琼脂培养基就是一种常用的培养基,它能够在37℃下培养24小时后,生长出腐生性细菌菌落总数,作为有机物污染程度和卫生指标的反映68。
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接种和培养条件:将水样接种于培养基中,并在特定的物理条件下进行培养,如36℃培养48小时,以促进需氧菌和兼性厌氧菌的生长2。
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菌落计数:在培养结束后,通过肉眼或显微镜观察并计数培养基上生长的细菌菌落。由于不同稀释度的水样可能会导致菌落数的差异,因此需要根据菌落数的比值来确定报告的数值。如果两个稀释度的平均菌落数比值小于2,则报告两者的平均数;如果比值大于2,则报告较少的菌落总数4。
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稀释平板计数法:当所有稀释度的平均菌落数均大于2时,应按照稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数来报告结果4。
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样品处理:在实验开始之前,需要对样品进行适当处理,例如将冻存管中的样品在常温下平衡至大约10摄氏度,然后使用无菌水进行稀释7。
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实验目的和意义:实验的目的是学习水样的采集和水样中细菌总数的测定方法,并了解水质状况与细菌总数之间的关系。此外,实验还旨在掌握平板计数法测定菌落总数,以及水中大肠菌群的检测方法,这对于评估水质和公共卫生安全具有重要意义159。
通过上述原理,实验者可以准确地测定水中的细菌总数,进而评估水体的微生物污染程度和水质状况。